PCR實驗室設計及建設要求 

概述: PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。是一種分子生物學技術。PCR實驗室可分為四個單獨區(qū)域:試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。 PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要
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PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。是一種分子生物學技術。PCR實驗室可分為四個單獨區(qū)域:試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,為避免各實驗區(qū)域間交叉污染,進入各個工作區(qū)域須遵循單方向進行,即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。


PCR試劑貯存和準備區(qū)

試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。
PCR標本制備區(qū)
該區(qū)域主要進行樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。
本區(qū)的壓力梯度要求為:鄰近區(qū)域為正壓,避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。

擴增反應混合物配制和擴增區(qū)

已制備的DNA模板 (來自樣本制備區(qū))的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。
本區(qū)的壓力梯度要求為:鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內(nèi)進行。

擴增產(chǎn)物分析區(qū)

本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。

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